Тема. БИОЭЛЕКТРИЧЕСКИЕ ПОТЕНЦИАЛЫ. ПОТЕНЦИАЛ ДЕЙСТВИЯ НЕРВА.
Вопросы теоретической подготовки:
1. Строение смешанного нерва. Классификация нервных волокон, функции различных типов нервных волокон.
2. Потенциал действия. Динамика изменения ионной проницаемости. Двухфазный и монофазный ПД. Следовые потенциалы.
3. Критический уровень деполяризации и понятие «порог раздражения».
4. Критический уровень деполяризации. Причины абсолютной и относительной рефрактерности.
5. Зависимость пороговой силы раздражения от длительности стимула и характеризующие ее показатели (хронаксия, реобаза, полезное время).
6. Распространение ПД по немиелинизированному волокну. Кабельные свойства нервного волокна, теория локальных токов. Факторы, определяющие скорость проведения возбуждения по нервному волокну.
7. Особенности проведения возбуждения по миелинизированным нервным волокнам.
ЗАДАЧА. ПОТЕНЦИАЛ ДЕЙСТВИЯ СЕДАЛИЩНОГО НЕРВА ЛЯГУШКИ
- зарегистрировать двухфазный и монофазный потенциалы действия;
- исследовать зависимость амплитуды пд от амплитуды раздражающего стимула;
- определить зависимость порога раздражения нерва от длительности стимула;
- измерить продолжительность периодов абсолютной и относительной рефрактерности
ПРИГОТОВЛЕНИЕ ПРЕПАРАТА СЕДАЛИЩНОГО НЕРВА ЛЯГУШКИ
Работа проводится на седалищном нерве (n. ischiadicus) лягушки, выделенном от позвоночника до коленного сустава. Лягушку обездвиживают обычным способом. Основные этапы приготовления препарата показаны на рис. 1.
Рис. 1. Приготовление препарата седалищного нерва лягушки. Описание в тексте.
Лягушку приподнимают ее за задние лапки таким образом, чтобы туловище и голова оказались внизу, при этом туловище сгибается и отчетливо вырисовывается позвоночник. Большими ножницами перерезают позвоночник приблизительно на уровне ‘/з от его нижнего конца (Рис. 1.1). Одновременно с этим удобно срезать с брюшной стороны часть кожи и свисающие вместе с ней внутренности.
Удерживая левой рукой остаток позвоночника, правой рукой захватывают край кожи, оставшейся со спинной стороны, и резким движением снимают кожу со спины и задних лапок (держать позвоночник и кожу удобнее всего кусочками марли или ваты) (Рис. 1.2).
После этого отрезают копчиковую кость — длинный отросток позвоночника (Рис. 1.3).
Задние лапки лягушки, освобожденные от кожи, кладут спинной стороной вниз на препаровальную ванночку, предварительно смоченную раствором Рингера. Оставшиеся внутренности (почки, семенники и др.) осторожно оттягивают пинцетом и отрезают малыми ножницами. После удаления внутренностей с правой и левой сторон от позвоночника отчетливо видны нервные сплетения седалищного нерва, выходящие из позвоночника каждый тремя корешками (Рис. 1.4).
Остаток позвоночника большими ножницами осторожно разрезают вдоль по средней линии и затем также осторожно, строго по средней линии разрезают лобковое сочленение и, таким образом, разъединяют лапки (по пунктирной линии на рис. 1.4).
Одну из лапок покрывают ватой, смоченной раствором Рингера, или отдают другой группе студентов. На другой лапке продолжают препаровку.
Стеклянным крючком слегка поднимают седалищное нервное сплетение и малыми ножницами подрезают вокруг него все ткани, отпрепаровывая нерв до тазобедренного сочленения (Рис. 1.5).
После этого препарат переворачивают спинной стороной вверх. На бедре видны полуперепончатая, двуглавая и трехглавая мышцы. Между двуглавой и перепончатой мышцами стеклянным крючком осторожно разрывают соединительнотканную пленку и, раздвинув эти мышцы, в глубине находят довольно толстый седалищный нерв, параллельно с которым идет бедренная артерия.
Нерв осторожно приподнимают стеклянным крючком (для того чтобы сильно не растянуть нерв, лучше брать его вместе с сосудом) и отпрепаровывают его до коленного сустава (Рис. 1.6), отрезая вокруг все мышечные ткани и подходящие к ним тонкие нервные веточки, отходящие от основного нервного ствола.
После того как нерв полностью отпрепарован, на его дистальный участок (около коленного сустава) накладывают лигатуру (Рис. 1.6).
Отрезают тазовую кость около позвоночника (Рис. 1.7).
Перерезают нерв между лигатурой и коленным суставом и выделяют нерв из тела лягушки (Рис. 1.8).
За лигатуру и часть позвоночника нерв переносят в специальную камеру с электродами (рис. 2). Первая пара электродов служит для нанесения раздражения — она соединена через изолирующий трансформатор с электростимулятором. Вторая пара электродов служит для внеклеточной регистрации ПД и соединена с входом осциллографа. Между этими парами электродов располагается электрод или пластинка заземления.
Препарат располагают в камере таким образом, чтобы его часть, содержащая больше волокон (около позвоночника), лежала на раздражающих электродах. На участок нерва, расположенный на заземляющем электроде, помещают маленький тампон, смоченный раствором Рингера. Дно камеры должно оставаться сухим, чтобы избежать закорачивания электродов. Камеру плотно закрывают крышкой.
