Цель: зарегистрировать результаты опыта по изучению бактерицидных свойств кожи (см. теоретическую справку)
Методика.
Для определения бактерицидной активности кожи суточную бульонную культуру кишечной палочки (1:50000) наносят на внутреннюю поверхность предплечья и распределяют равномерно шпателем. Делают отпечаток на предметное стекло со средой Эндо с одного участка исследуемой кожи, а через 15 минут — со смежного. Инкубируют посевы 18-24 часа при 37°С и подсчитывают колонии на 3 см2 поверхности каждой пластины.
Индекс бактерицидности (ИБ) вычисляют по формуле:
ИБ = К1-К2 х100
К1
где K l — количество колоний сразу после нанесения на кожу тест-штамма микроорганизмоов, К 2 — количество колоний через 15 минут после контакта с кожей.
У здоровых людей ИБ равен 90-100%
Дано:
1) посев-отпечаток с участка кожи с тест-культурой на предметном стекле со средой Эндо.
Результат:___________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
2) посев-отпечаток со смежного участка кожи через 15 мин после нанесения тест-культуры
Результат:____________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Вывод:______________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Работа № 4. Бактерицидная активность лизоцима слюны
Цель:определить активность лизоцима слюны (см. теоретическую справку)
Дано: набор для определения активности лизоцима: раствор слюны 1:20, взвесь суточной агаровой культуры микрококка, физиологический раствор, пипетки, пробирки.
Методика:
В пробирки «К» и «О» внести по 0,5 мл физ. раствора и раствора слюны, в каждую пробирку добавить по 0,5 мл взвеси культуры микрококка, встряхнуть; поставить в термостат на 30 мин.
«К» «О»
Результат:___________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Работа № 5. Бактерицидная активность сыворотки крови (БАСК)
Цель: Определить БАСК по отношению к кишечной палочке по методике, предложенной А.Д. Евтушенко с соав., 1982
Методика:
Из 18-ти часовой культуры кишечной палочки методом серийных разведений готовят рабочую концентрацию до 40-50 тыс. м. т. в 1 мл. Рабочую взвесь тест-микробов в количестве 0,1 мл высевают на чашку Петри с МПА. Шаблоном диаметром 20 мм по поверхности агара с культурой микроорганизмов делают отверстия (в центре и по периферии отмечают контрольные отверстия, на которые не наносится испытуемая сыворотка). На каждую площадку с посевом тест-культуры наносят пипеткой 0,05 мл исследуемой сыворотки. Через 24 часа инкубации в условиях термостата проводят подсчет выросших колоний, как на опытных, так и на контрольных площадках. Бактерицидную активность сыворотки крови рассчитывают по формуле:
БАСК(%) =100 х (1 — конечное количество жизнеспособных бактерий)
исходное количество бактерий
Нормативное значение — 80 — 90%
Дано: опыт по определению БАСК у четырех пациентов (см. теоретическую справку)
Результат:_______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Вывод:________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Работа № 6. Фагоцитоз
Цель:Микроскопировать готовые препараты-мазки стафилококка и гонококка. Зарисовать в тетради картину фагоцитоза микроорганизмов. Выявить отличительные особенности завершенного (№ 1) и незавершенного (№ 2) фагоцитоза в препаратах-мазках. Сделать вывод.
